Multipleksni komplet za PCR u realnom vremenu za novi koronavirus (SARS-CoV-2).
Ovaj visoko osjetljiv, spreman za upotrebu PCR komplet dostupan je u liofiliziranom formatu (proces sušenja zamrzavanjem) za dugotrajno skladištenje.Komplet se može transportovati i čuvati na sobnoj temperaturi i stabilan je godinu dana.Svaka epruveta premiksa sadrži sve reagense potrebne za PCR amplifikaciju, uključujući reverznu transkriptazu, Taq polimerazu, prajmere, sonde i dNTPs supstrate.Potrebno je samo dodati 13ul destilovane vode i 5ul ekstrahovane RNK šablone, a zatim se može pokrenuti i pojačati na PCR instrumentima.
qPCR aparat treba da ispunjava sledeće zahteve:
1. Postavite 8 traka za PCR epruvetu zapremine 0,2 ml
2. Imati više od četiri kanala za detekciju:
| Kanal | ekscitacija (nm) | Emisija (nm) | Prethodno kalibrirane boje |
| 1. | 470 | 525 | FAM, SYBR Zeleni I |
| 2 | 523 | 564 | VIC, HEX, TET, JOE |
| 3. | 571 | 621 | ROX, TEXAS-RED |
| 4 | 630 | 670 | CY5 |
PCR platforme:
7500 PCR sistem u realnom vremenu, Biorad CF96, iCycler iQ™ PCR sistem detekcije u realnom vremenu, Stratagene Mx3000P, Mx3005P
Teškoća transporta hladnog lanca reagensa za detekciju nukleinske kiseline novog koronavirusa
Kada se konvencionalni reagensi za detekciju nukleinske kiseline transportuju na velike udaljenosti, potrebno je skladištenje i transport hladnog lanca (-20±5) ℃ kako bi se osiguralo da bioaktivnost enzima u reagensima ostane aktivna.Da bi temperatura dostigla standardnu, potrebno je nekoliko kilograma suhog leda za svaku kutiju reagensa za testiranje nukleinske kiseline čak i manje od 50 g, ali može trajati samo dva ili tri dana.Iz perspektive industrijske prakse, stvarna težina reagensa koje izdaju proizvođači je manja od 10% (ili daleko manja od ove vrijednosti) kontejnera.Većina težine dolazi od suhog leda, paketa leda i kutija od pjene, tako da su troškovi transporta izuzetno visoki.
U martu 2020. COVID-19 je počeo da se širi u inostranstvu, a potražnja za reagensom za otkrivanje nukleinske kiseline novog korona virusa dramatično se povećala.Uprkos visokim troškovima izvoza reagensa u hladnom lancu, većina proizvođača ga ipak može prihvatiti zbog velike količine i visokog profita.
Međutim, unapređenjem nacionalnih izvoznih politika za antipandemijske proizvode, kao i unapređenjem nacionalne kontrole nad protokom ljudi i logistike, dolazi do produženja i nesigurnosti u vremenu transporta reagensa, što je rezultiralo izraženim problemima sa proizvodima uzrokovanim prevozom.Produženo vrijeme transporta (vrijeme transporta od oko pola mjeseca je vrlo često) dovodi do čestih kvarova proizvoda kada proizvod stigne do klijenta.Ovo je uznemirilo većinu preduzeća za izvoz reagensa nukleinske kiseline.
Liofilizirana tehnologija za PCR reagens pomogla je u transportu reagensa za otkrivanje nukleinske kiseline novog koronavirusa širom svijeta
Liofilizirani PCR reagensi se mogu transportirati i čuvati na sobnoj temperaturi, što ne samo da može smanjiti troškove transporta, već i izbjeći probleme s kvalitetom uzrokovane procesom transporta.Stoga je liofilizacija reagensa najbolji način da se riješi problem izvoznog transporta.
Liofilizacija uključuje zamrzavanje otopine u čvrsto stanje, a zatim sublimiranje i odvajanje vodene pare u vakuumu.Osušeni rastvor ostaje u posudi istog sastava i aktivnosti.U poređenju s konvencionalnim tekućim reagensima, punokomponentni liofilizirani reagens za detekciju nukleinske kiseline Novel Coronavirusa koji proizvodi Liming Bio ima sljedeće karakteristike:
Izuzetno jaka toplotna stabilnost:može stajati na 56℃ tokom 60 dana, a morfologija i učinak reagensa ostaju nepromijenjeni.
Čuvanje i transport na normalnoj temperaturi:nema potrebe za rashladnim lancem, nema potrebe za skladištenjem na niskoj temperaturi prije otvaranja, potpuno oslobodite prostor za hladno skladištenje.
Spremno za upotrebu:liofilizacija svih komponenti, nema potrebe za konfiguracijom sistema, izbjegavajući gubitak komponenti visokog viskoziteta kao što je enzim.
Multipleks mete u jednoj cijevi:cilj detekcije pokriva novi gen ORF1ab koronavirusa, gen N, S gen kako bi se izbjegla genovarijacija virusa.U cilju smanjenja lažno negativnih, humani RNase P gen se koristi kao interna kontrola, kako bi se zadovoljile kliničke potrebe za kontrolom kvaliteta uzorka.
