PROM Rapid Test
NAMJERAVANU UPOTREBU
The StrongStep®PROM test je vizuelno interpretiran, kvalitativni imunohromatografski test za detekciju IGFBP-1 iz amnionske tečnosti u vaginalnom sekretu tokom trudnoće.Test je namijenjen za profesionalnu upotrebu kako bi pomogao u dijagnosticiranju rupture fetalnih membrana (ROM) kod trudnica.
UVOD
Koncentracija IGFBP-1 (inzulinu sličan faktor rasta koji vezuje protein-1) u amnionskoj tečnosti je 100 do 1000 puta veća nego u serumu majke.IGFBP-1 obično nije prisutan u vagini, ali nakon rupture fetalnih membrana, amnionska tekućina s visokom koncentracijom IGFBP-1 miješa se s vaginalnim sekretom.U StrongStep® PROM testu, uzorak vaginalnog sekreta se uzima sterilnim poliesterskim štapićem i uzorak se ekstrahuje u rastvor za ekstrakciju uzorka.Prisustvo IGFBP-1 u rastvoru detektuje se pomoću uređaja za brzi test.
PRINCIP
The StrongStep®PROM Test koristi kolor imunohromatografsku tehnologiju kapilarnog protoka.Procedura testiranja zahtijeva solubilizaciju IGFBP-1 iz vaginalnog brisa miješanjem brisa u puferu za uzorke.Zatim se miješani pufer za uzorke dodaje u bunar za uzorke test kasete i smjesa migrira duž površine membrane.Ako je IGFBP-1 prisutan u uzorku, on će formirati kompleks sa primarnim anti-IGFBP-1 antitijelom konjugiranim na obojene čestice.Kompleks će tada biti vezan drugim anti-IGFBP-1 antitelom obloženim na nitroceluloznoj membrani.Pojava vidljive test linije zajedno sa kontrolnom linijom će ukazati na pozitivan rezultat.
KIT KOMPONENTE
| 20 Pojedinačno stracked test uređaje | Svaki uređaj sadrži traku sa obojenim konjugatima i reaktivnim reagensima prethodno premazanim na odgovarajućim područjima. |
| 2EkstrakcijaPufer bočica | 0,1 M fiziološki rastvor sa fosfatnim puferom (PBS) i 0,02% natrijum azida. |
| 1 bris za pozitivnu kontrolu (samo na zahtjev) | Sadrži IGFBP-1 i natrijum-azid.Za vanjsku kontrolu. |
| 1 negativan kontrolni bris (samo na zahtjev) | Ne sadrži IGFBP-1.Za eksternu kontrolu. |
| 20 Cevi za ekstrakciju | Za pripremu uzoraka. |
| 1 Radna stanica | Mjesto za držanje puferskih bočica i epruveta. |
| 1 Umetak paketa | Za uputstva za rad. |
POTREBNI MATERIJALI ALI NIJE OBEZBEĐENI
| Tajmer | Za korištenje vremena. |
MJERE PREDOSTROŽNOSTI
■ Samo za profesionalnu in vitro dijagnostičku upotrebu.
■ Ne koristiti nakon isteka roka trajanja navedenog na pakovanju.Nemojte koristiti test ako je njegova vrećica od folije oštećena.Nemojte ponovo koristiti testove.
■ Ovaj komplet sadrži proizvode životinjskog porijekla.Potvrđeno poznavanje porekla i/ili sanitarnog stanja životinja ne garantuje u potpunosti odsustvo prenosivih patogenih agenasa.Stoga se preporučuje da se ovi proizvodi tretiraju kao potencijalno zarazni i da se njima rukuje poštujući uobičajene sigurnosne mjere (ne gutati ili udisati).
■ Izbjegnite unakrsnu kontaminaciju uzoraka korištenjem novog kontejnera za sakupljanje uzoraka za svaki dobijeni uzorak.
■ Pažljivo pročitajte cijelu proceduru prije izvođenja bilo kakvih testova.
■ Nemojte jesti, piti ili pušiti u oblasti u kojoj se rukuje uzorcima i kompletima.Rukujte svim uzorcima kao da sadrže infektivne agense.Pridržavajte se utvrđenih mjera predostrožnosti protiv mikrobioloških opasnosti tokom cijelog postupka i slijedite standardne procedure za pravilno odlaganje uzoraka.Nosite zaštitnu odjeću kao što su laboratorijski mantili, jednokratne rukavice i zaštita za oči kada se ispituju uzorci.
■ Nemojte mijenjati ili miješati reagense iz različitih serija.Nemojte miješati čepove boca s rastvorom.
■ Vlažnost i temperatura mogu negativno uticati na rezultate.
■ Kada je postupak analize završen, pažljivo odložite briseve nakon što ste ih autoklavirali na 121°C najmanje 20 minuta.Alternativno, mogu se tretirati sa 0,5% natrijum hipohlorida (ili kućnim izbjeljivačem) jedan sat prije odlaganja.Korištene materijale za testiranje treba baciti u skladu s lokalnim, državnim i/ili saveznim propisima.
■ Nemojte koristiti citološke četkice kod trudnica.
SKLADIŠTENJE I STABILNOST
■ Komplet treba čuvati na 2-30°C do isteka roka trajanja odštampanog na zapečaćenoj vrećici.
■ Test mora ostati u zapečaćenoj vrećici do upotrebe.
■ Nemojte zamrzavati.
■ Treba voditi računa o zaštiti komponenti u ovom kompletu od kontaminacije.Nemojte koristiti ako postoje dokazi o mikrobnoj kontaminaciji ili precipitaciji.Biološka kontaminacija opreme za doziranje, kontejnera ili reagensa može dovesti do lažnih rezultata.
PRIKUPLJANJE I SKLADIŠTENJE UZORAKA
Koristite samo Dacron ili Rayon sterilne štapiće sa plastičnim drškama.Preporučljivo je koristiti bris koji je isporučen od proizvođača kompleta (brisevi se ne nalaze u ovom kompletu, za informacije o narudžbi, molimo kontaktirajte proizvođača ili lokalnog distributera, kataloški broj je 207000).Brisevi drugih dobavljača nisu validirani.Ne preporučuju se štapići s pamučnim vrhovima ili drvenim drškama.
■ Uzorak se uzima pomoću sterilnog poliesterskog štapića.Uzorak treba uzeti prije digitalnog pregleda i/ili transvaginalnog ultrazvuka.Pazite da ništa ne dodirnete štapićem prije uzimanja uzorka.Pažljivo umetnite vrh štapića u vaginu prema stražnjem forniksu dok ne dođe do otpora.Alternativno, uzorak se može uzeti iz stražnjeg forniksa tokom sterilnog pregleda spekuluma.Bris treba ostaviti u vagini 10-15 sekundi kako bi upijao vaginalni sekret.Pažljivo izvucite štapić!.
■ Stavite bris u epruvetu za ekstrakciju, ako se test može odmah pokrenuti.Ako trenutno testiranje nije moguće, uzorke pacijenta treba staviti u suhu transportnu epruvetu za skladištenje ili transport.Brisevi se mogu čuvati 24 sata na sobnoj temperaturi (15-30°C) ili 1 nedelju na 4°C ili ne duže od 6 meseci na -20°C.Sve uzorke treba ostaviti da dostignu sobnu temperaturu od 15-30°C prije testiranja.
POSTUPAK
Donesite testove, uzorke, pufer i/ili kontrole na sobnu temperaturu (15-30°C) prije upotrebe.
■ Postavite čistu ekstrakcijsku cijev u određeno područje radne stanice.Dodajte 1ml pufera za ekstrakciju u epruvetu za ekstrakciju.
■ Stavite bris uzorka u epruvetu.Snažno promiješajte otopinu tako što ćete tampon snažno rotirati uz bočnu stranu epruvete najmanje deset puta (dok je potopljen).Najbolji rezultati se postižu kada se uzorak snažno miješa u otopini.
■ Iscijedite što je više moguće tekućine iz štapića tako što ćete stisnuti stranu fleksibilne cijevi za ekstrakciju dok se bris vadi.Najmanje 1/2 puferske otopine uzorka mora ostati u epruveti da bi se dogodila adekvatna kapilarna migracija.Stavite poklopac na ekstrahovanu epruvetu.
Bacite bris u odgovarajući kontejner za bioopasan otpad.
■ Ekstrahovani uzorci mogu da se drže na sobnoj temperaturi 60 minuta bez uticaja na rezultat testa.
■ Izvadite test iz zapečaćene vrećice i stavite ga na čistu, ravnu površinu.Označite uređaj identifikacijom pacijenta ili kontrole.Da bi se postigao najbolji rezultat, test treba obaviti u roku od jednog sata.
■ Dodajte 3 kapi (približno 100 µl) ekstrahovanog uzorka iz epruvete za ekstrakciju u bunar za uzorke na test kaseti.
Izbjegavajte hvatanje mjehurića zraka u otvoru za uzorak (S) i nemojte ispuštati nikakav rastvor u prozorčić za posmatranje.
Kako test počne da radi, videćete da se boja kreće preko membrane.
■ Sačekajte da se pojave trake u boji.Rezultat treba očitati nakon 5 minuta.Nemojte tumačiti rezultat nakon 5 minuta.
Bacite korištene epruvete i test kasete u odgovarajući kontejner za bioopasan otpad.
TUMAČENJE REZULTATA
| POZITIVNOREZULTAT:
| Na membrani se pojavljuju dvije trake u boji.Jedna traka se pojavljuje u kontrolnoj regiji (C), a druga traka se pojavljuje u testnoj regiji (T). |
| NEGATIVNOREZULTAT:
| U kontrolnoj regiji (C) pojavljuje se samo jedna traka u boji.U ispitnom području (T) ne pojavljuje se očigledna obojena traka. |
| INVALIDREZULTAT:
| Kontrolni pojas se ne pojavljuje.Rezultati bilo kojeg testa koji nije proizveo kontrolnu traku u određenom vremenu očitavanja moraju se odbaciti.Pregledajte proceduru i ponovite sa novim testom.Ako se problem nastavi, odmah prekinite korištenje kompleta i kontaktirajte svog lokalnog distributera. |
BILJEŠKA:
1. Intenzitet boje u ispitnom području (T) može varirati ovisno o koncentraciji ciljanih tvari prisutnih u uzorku.Ali nivo supstanci se ne može odrediti ovim kvalitativnim testom.
2. Nedovoljna zapremina uzorka, pogrešna procedura rada ili izvođenje testova s isteklim rokom trajanja su najvjerovatniji razlozi za otkaz kontrolne trake.
KONTROLA KVALITETA
■ Interne proceduralne kontrole su uključene u test.Obojena traka koja se pojavljuje u kontrolnom području (C) smatra se internom pozitivnom proceduralnom kontrolom.To potvrđuje dovoljan volumen uzorka i ispravnu proceduru.
■ Eksterne proceduralne kontrole mogu biti obezbeđene (samo na zahtev) u kompletima kako bi se osiguralo da testovi ispravno funkcionišu.Takođe, kontrole se mogu koristiti za demonstriranje ispravnih performansi operatera testa.Da biste izvršili pozitivnu ili negativnu kontrolu, dovršite korake u odjeljku Procedura testiranja tretirajući kontrolni bris na isti način kao i bris uzorka.
OGRANIČENJA TESTA
1. Ne treba vršiti kvantitativno tumačenje na osnovu rezultata ispitivanja.
2. Nemojte koristiti test ako njegova torbica od aluminijske folije ili pečati vrećice nisu netaknuti.
3. Pozitivan StrongStep®Rezultat PROM testa, iako otkriva prisustvo amnionske tečnosti u uzorku, ne locira mjesto rupture.
4. Kao i kod svih dijagnostičkih testova, rezultati se moraju tumačiti u svjetlu drugih kliničkih nalaza.
5. Ako je došlo do rupture fetalnih membrana, ali je curenje amnionske tečnosti prestalo više od 12 sati prije uzimanja uzorka, IGFBP-1 je možda razgrađen proteazama u vagini i test može dati negativan rezultat.
KARAKTERISTIKE PERFORMANSE
Tabela: StrongStep®PROM Test naspram drugog brenda PROM Test
|
Relativna osjetljivost: |
| Druga marka |
| ||
| + | - | Ukupno | |||
| StrongStep®MATURSKO VEČE Test | + | 63 | 3 | 66 | |
| - | 2 | 138 | 140 | ||
|
| 65 | 141 | 206 | ||
Analitička osjetljivost
Najmanja količina IGFBP-1 u ekstrahovanom uzorku je 12,5 μg/l.
Interferentne supstance
Morate paziti da se aplikator ili cervikovaginalni sekret ne kontaminiraju lubrikantima, sapunima, dezinficijensima ili kremama.Lubrikanti ili kreme mogu fizički ometati apsorpciju uzorka na aplikator.Sapuni ili dezinficijensi mogu ometati reakciju antitijelo-antigen.
Potencijalne interferirajuće supstance su testirane u koncentracijama koje bi se razumno mogle naći u cervikovaginalnom sekretu.Sljedeće supstance nisu interferirale u testu kada su testirane na navedenim nivoima.
| Supstanca | Koncentracija | Supstanca | Koncentracija |
| ampicilin | 1,47 mg/mL | Prostaglandin F2 | 0,033 mg/mL |
| Eritromicin | 0,272 mg/mL | Prostaglandin E2 | 0,033 mg/mL |
| Urin majke 3. trimestar | 5% (volumen) | MonistatR (mikonazol) | 0,5 mg/mL |
| Oksitocin | 10 IU/mL | Indigo Carmine | 0,232 mg/mL |
| terbutalin | 3,59 mg/mL | Gentamicin | 0,849 mg/mL |
| Deksametazon | 2,50 mg/mL | BetadineR Gel | 10 mg/mL |
| MgSO4•7H2O | 1,49 mg/mL | BetadineR Cleanser | 10 mg/mL |
| Ritodrine | 0,33 mg/mL | K-YR Jelly | 62,5 mg/mL |
| DermicidolR 2000 | 25,73 mg/mL |
LITERATURA
Erdemoglu i Mungan T. Značaj detekcije inzulinskog faktora rasta koji vezuje protein-1 u cervikovaginalnom sekretu: poređenje sa nitrazinskim testom i procjenom volumena amnionske tekućine.Acta Obstet Gynecol Scand (2004) 83:622-626.
Kubota T i Takeuchi H. Procjena inzulinskog faktora rasta koji vezuje protein-1 kao dijagnostički alat za rupture membrana.J Obstet Gynecol Res (1998) 24:411-417.
Rutanen EM et al.Procjena brzog testa trake za protein-1 koji vezuje inzulinski faktor rasta u dijagnozi rupture fetalnih membrana.Clin Chim Acta (1996) 253:91-101.
Rutanen EM, Pekonen F, Karkkainen T. Mjerenje proteina-1 koji vezuje inzulinski faktor rasta u cervikalnom/vaginalnom sekretu: poređenje sa ROM-check Membrane Immunoassay u dijagnozi rupture fetalnih membrana.Clin Chim Acta (1993) 214:73-81.
RJEČNIK SIMBOLA
|
| Kataloški broj |  | Ograničenje temperature |
 | Pogledajte uputstva za upotrebu |
| Batch code |
 | In vitro dijagnostički medicinski uređaj |  | Koristite do |
 | Proizvođač |  | Sadrži dovoljno zatestovi |
 | Nemojte ponovo koristiti |  | Ovlašteni predstavnik u Evropskoj zajednici |
 | Oznaka CE prema IVD Direktivi o medicinskim uređajima 98/79/EC | ||
