Brzi test fetalnog fibronektina
NAMJENA KORIŠĆENJE
The StrongStep®PROM test je vizualno interpretiran imunohromatografski test namijenjen za kvalitativno otkrivanje fetalnog fibronektina u cervikovaginalnom sekretu.Prisustvo fetalnog fibronektina u cervikovaginalnom sekretu između 22 nedelje, 0 dana i 34 nedelje, 6 dana gestacije jepovezana s povećanim rizikom od prijevremenog porođaja.
UVOD
Prijevremeni porođaj, koji je Američki koledž opstetričara i ginekologa definirao kao porođaj prije 37. sedmice gestacije, odgovoran je za većinu nehromozomskog perinatalnog morbiditeta i mortaliteta.Simptomi prijetećeg prijevremenog porođaja uključuju kontrakcije maternice, promjenu vaginalnog iscjetka, vaginalno krvarenje, bol u leđima, nelagodu u trbuhu, pritisak u zdjelici i grčeve.Dijagnostički modaliteti za identifikaciju prijetećeg prijevremenog porođaja uključuju praćenje aktivnosti maternice i izvođenje digitalnog cervikalnog pregleda, koji omogućava procjenu dimenzija grlića materice.Pokazalo se da su ove metode ograničene, budući da se minimalna dilatacija grlića materice (< 3 centimetra) i aktivnost maternice odvijaju normalno i ne moraju nužno biti dijagnostički neposredan prijevremeni porođaj.Iako je procijenjeno nekoliko serumskih biohemijskih markera, nijedan nije široko prihvaćen za praktičnu kliničku upotrebu.
Fetalni fibronektin (fFN), izoforma fibronektina, je složeni adhezivni glikoprotein s molekulskom težinom od približno 500.000 daltona.Matsuura i saradnici opisali su monoklonsko antitijelo nazvano FDC-6, koje specifično prepoznaje III-CS, regiju koja definira fetalnu izoformu fibronektina.Imunohistohemijske studije placente su pokazale da je fFNograničen na ekstracelularni matriks regije koja definira spojmajčinih i fetalnih jedinica unutar materice.
Fetalni fibronektin se može otkriti u cervikovaginalnom sekretu žena tokom trudnoće upotrebom imunotesta baziranog na monoklonskim antitijelima.Fetalni fibronektin je povišen u cervikovaginalnom sekretu tokom rane trudnoće, ali je smanjen sa 22 na 35 sedmicu u normalnim trudnoćama.Nije shvaćen značaj njegovog prisustva u vagini tokom ranih nedelja trudnoće.Međutim, to može jednostavno odražavati normalan rast populacije ekstraviloznog trofoblasta i placente.Otkrivanje fFN u cervikovaginalnom sekretu između 22 sedmice, 0 dana i 34 sedmice, 6 dana gestacije je povezano s prijevremenim porođajem kod simptomatskih i između 22 sedmice, 0 dana i 30 sedmica, 6 dana kod asimptomatskih trudnica.
PRINCIP
The StrongStep®fFN Test koristi kolor imunohromatografsku tehnologiju kapilarnog protoka.Postupak testiranja zahtijeva solubilizaciju fFN iz vaginalnog brisa miješanjem brisa u puferu za uzorke.Zatim se miješani pufer za uzorke dodaje u bunar za uzorke test kasete i smjesa migrira duž površine membrane.Ako je fFN prisutan u uzorku, on će formirati kompleks sa primarnim anti-fFN antitijelom konjugiranim na obojene čestice.Kompleks će tada biti vezan drugim anti-fFN antitelom obloženim na nitroceluloznoj membrani.Pojava vidljive test linije zajedno sa kontrolnom linijom će ukazati na pozitivan rezultat.
KIT KOMPONENTE
| 20 Pojedinačno stracked test uređaje | Svaki uređaj sadrži traku sa obojenim konjugatima i reaktivnim reagensima prethodno premazanim na odgovarajućim područjima. |
| 2EkstrakcijaPufer bočica | 0,1 M fiziološki rastvor sa fosfatnim puferom (PBS) i 0,02% natrijum azida. |
| 1 bris za pozitivnu kontrolu (samo na zahtjev) | Sadrži fFN i natrijum-azid.Za vanjsku kontrolu. |
| 1 negativan kontrolni bris (samo na zahtjev) | Ne sadrži fFN.Za eksternu kontrolu. |
| 20 Cevi za ekstrakciju | Za pripremu uzoraka. |
| 1 Radna stanica | Mjesto za držanje puferskih bočica i epruveta. |
| 1 Umetak paketa | Za uputstva za rad. |
POTREBNI MATERIJALI ALI NIJE OBEZBEĐENI
| Tajmer | Za korištenje vremena. |
MJERE PREDOSTROŽNOSTI
■ Samo za profesionalnu in vitro dijagnostičku upotrebu.
■ Ne koristiti nakon isteka roka trajanja navedenog na pakovanju.Nemojte koristiti test ako je njegova vrećica od folije oštećena.Nemojte ponovo koristiti testove.
■ Ovaj komplet sadrži proizvode životinjskog porijekla.Potvrđeno poznavanje porekla i/ili sanitarnog stanja životinja ne garantuje u potpunosti odsustvo prenosivih patogenih agenasa.Stoga se preporučuje da se ovi proizvodi tretiraju kao potencijalno zarazni i da se njima rukuje poštujući uobičajene sigurnosne mjere (ne gutati ili udisati).
■ Izbjegnite unakrsnu kontaminaciju uzoraka korištenjem novog kontejnera za sakupljanje uzoraka za svaki dobijeni uzorak.
■ Pažljivo pročitajte cijelu proceduru prije izvođenja bilo kakvih testova.
■ Nemojte jesti, piti ili pušiti u oblasti u kojoj se rukuje uzorcima i kompletima.Rukujte svim uzorcima kao da sadrže infektivne agense.Pridržavajte se utvrđenih mjera predostrožnosti protiv mikrobioloških opasnosti tokom cijelog postupka i slijedite standardne procedure za pravilno odlaganje uzoraka.Nosite zaštitnu odjeću kao što su laboratorijski mantili, jednokratne rukavice i zaštita za oči kada se ispituju uzorci.
■ Nemojte mijenjati ili miješati reagense iz različitih serija.Nemojte miješati čepove boca s rastvorom.
■ Vlažnost i temperatura mogu negativno uticati na rezultate.
■ Kada je postupak analize završen, pažljivo odložite briseve nakon što ste ih autoklavirali na 121°C najmanje 20 minuta.Alternativno, mogu se tretirati sa 0,5% natrijum hipohlorida (ili kućnim izbjeljivačem) jedan sat prije odlaganja.Korištene materijale za testiranje treba baciti u skladu s lokalnim, državnim i/ili saveznim propisima.
■ Nemojte koristiti citološke četkice kod trudnica.
SKLADIŠTENJE I STABILNOST
■ Komplet treba čuvati na 2-30°C do isteka roka trajanja odštampanog na zapečaćenoj vrećici.
■ Test mora ostati u zapečaćenoj vrećici do upotrebe.
■ Nemojte zamrzavati.
■ Treba voditi računa o zaštiti komponenti u ovom kompletu od kontaminacije.Nemojte koristiti ako postoje dokazi o mikrobnoj kontaminaciji ili precipitaciji.Biološka kontaminacija opreme za doziranje, kontejnera ili reagensa može dovesti do lažnih rezultata.
PRIKUPLJANJE I SKLADIŠTENJE PECIMENA
■ Koristite samo Dacron ili Rayon sterilne štapiće sa plastičnim drškama.Preporučljivo je koristiti bris koji je isporučen od proizvođača kompleta (brisevi se ne nalaze u ovom kompletu, za informacije o narudžbi, molimo kontaktirajte proizvođača ili lokalnog distributera, kataloški broj je 207000).Brisevi drugih dobavljača nisu validirani.Ne preporučuju se štapići s pamučnim vrhovima ili drvenim drškama.
■ Cervikovaginalni sekret se dobija iz zadnjeg forniksa vagine.Proces prikupljanja treba da bude nežan.Snažno ili nasilno sakupljanje, uobičajeno za mikrobiološke kulture, nije potrebno.Tokom pregleda spekulumom, prije bilo kakvog pregleda ili manipulacije cerviksa ili vaginalnog trakta, lagano rotirajte vrh aplikatora preko stražnjeg forniksa vagine otprilike 10 sekundi kako biste apsorbirali cervikovaginalni sekret.Naknadni pokušaji zasićenja vrha aplikatora mogu poništiti test.Uklonite aplikator i izvršite test prema dolje navedenim uputama.
■ Stavite bris u epruvetu za ekstrakciju, ako se test može odmah pokrenuti.Ako trenutno testiranje nije moguće, uzorke pacijenta treba staviti u suhu transportnu epruvetu za skladištenje ili transport.Brisevi se mogu čuvati 24 sata na sobnoj temperaturi (15-30°C) ili 1 nedelju na 4°C ili ne duže od 6 meseci na -20°C.Sve uzorke treba ostaviti da dostignu sobnu temperaturu od 15-30°C prije testiranja.
POSTUPAK
Donesite testove, uzorke, pufer i/ili kontrole na sobnu temperaturu (15-30°C) prije upotrebe.
■ Postavite čistu ekstrakcijsku cijev u određeno područje radne stanice.Dodajte 1ml pufera za ekstrakciju u epruvetu za ekstrakciju.
■ Stavite bris uzorka u epruvetu.Snažno promiješajte otopinu tako što ćete tampon snažno rotirati uz bočnu stranu epruvete najmanje deset puta (dok je potopljen).Najbolji rezultati se postižu kada se uzorak snažno miješa u otopini.
■ Iscijedite što je više moguće tekućine iz štapića tako što ćete stisnuti stranu fleksibilne cijevi za ekstrakciju dok se bris vadi.Najmanje 1/2 puferske otopine uzorka mora ostati u epruveti da bi se dogodila adekvatna kapilarna migracija.Stavite poklopac na ekstrahovanu epruvetu.
Bacite bris u odgovarajući kontejner za bioopasan otpad.
■ Ekstrahovani uzorci mogu da se drže na sobnoj temperaturi 60 minuta bez uticaja na rezultat testa.
■ Izvadite test iz zapečaćene vrećice i stavite ga na čistu, ravnu površinu.Označite uređaj identifikacijom pacijenta ili kontrole.Da bi se postigao najbolji rezultat, test treba obaviti u roku od jednog sata.
■ Dodajte 3 kapi (približno 100 µl) ekstrahovanog uzorka iz epruvete za ekstrakciju u bunar za uzorke na test kaseti.
Izbjegavajte hvatanje mjehurića zraka u otvoru za uzorak (S) i nemojte ispuštati nikakav rastvor u prozorčić za posmatranje.
Kako test počne da radi, videćete da se boja kreće preko membrane.
■ Sačekajte da se pojave trake u boji.Rezultat treba očitati nakon 5 minuta.Nemojte tumačiti rezultat nakon 5 minuta.
Bacite korištene epruvete i test kasete u odgovarajući kontejner za bioopasan otpad.
TUMAČENJE REZULTATA
| POZITIVNOREZULTAT:
| Na membrani se pojavljuju dvije trake u boji.Jedna traka se pojavljuje u kontrolnoj regiji (C), a druga traka se pojavljuje u testnoj regiji (T). |
| NEGATIVNOREZULTAT:
| U kontrolnoj regiji (C) pojavljuje se samo jedna traka u boji.U ispitnom području (T) ne pojavljuje se očigledna obojena traka. |
| INVALIDREZULTAT:
| Kontrolni pojas se ne pojavljuje.Rezultati bilo kojeg testa koji nije proizveo kontrolnu traku u određenom vremenu očitavanja moraju se odbaciti.Pregledajte proceduru i ponovite sa novim testom.Ako se problem nastavi, odmah prekinite korištenje kompleta i kontaktirajte svog lokalnog distributera. |
BILJEŠKA:
1. Intenzitet boje u ispitnom području (T) može varirati ovisno o koncentraciji ciljanih tvari prisutnih u uzorku.Ali nivo supstanci se ne može odrediti ovim kvalitativnim testom.
2. Nedovoljna zapremina uzorka, pogrešna procedura rada ili izvođenje testova s isteklim rokom trajanja su najvjerovatniji razlozi za otkaz kontrolne trake.
KONTROLA KVALITETA
■ Interne proceduralne kontrole su uključene u test.Obojena traka koja se pojavljuje u kontrolnom području (C) smatra se internom pozitivnom proceduralnom kontrolom.To potvrđuje dovoljan volumen uzorka i ispravnu proceduru.
■ Eksterne proceduralne kontrole mogu biti obezbeđene (samo na zahtev) u kompletima kako bi se osiguralo da testovi ispravno funkcionišu.Takođe, kontrole se mogu koristiti za demonstriranje ispravnih performansi operatera testa.Da biste izvršili pozitivnu ili negativnu kontrolu, dovršite korake u odjeljku Procedura testiranja tretirajući kontrolni bris na isti način kao i bris uzorka.
OGRANIČENJA TESTA
1. Ovaj test se može koristiti samo za kvalitativnu detekciju fetalnog fibronektina u cervikovaginalnom sekretu.
2. Rezultate testova uvijek treba koristiti zajedno s drugim kliničkim i laboratorijskim podacima za upravljanje pacijentom.
3. Uzorke treba uzeti prije digitalnog pregleda ili manipulacije cerviksa.Manipulacije cerviksa mogu dovesti do lažno pozitivnih rezultata.
4. Uzorke ne treba uzimati ako je pacijent imao seksualni odnos u roku od 24 sata da bi se eliminisali lažno pozitivni rezultati.
5. Pacijentice sa sumnjivom ili poznatom abrupcijom placente, previjanjem posteljice ili umjerenim ili velikim vaginalnim krvarenjem ne treba se testirati.
6. Pacijente sa serklažom ne treba testirati.
7. Karakteristike performansi StrongStepa®fFN test je zasnovan na studijama kod žena sa jednoplodnom gestacijom.Izvedba nije potvrđena na pacijentima s višestrukom gestacijom, npr. blizancima.
8. StrongStep®fFN test nije predviđen za izvođenje u prisustvu rupture amnionske membrane i rupturu amnionske membrane treba isključiti prije provođenja testa.
KARAKTERISTIKE PERFORMANSE
Tabela: StrongStep® fFN test naspram fFN testa drugog brenda
| Relativna osjetljivost: 97,96% (89,13%-99,95%)* Relativna specifičnost: 98,73% (95,50%-99,85%)* Opšti dogovor: 98,55% (95,82%-99,70%)* *95% interval pouzdanosti |
| Druga marka |
| ||
| + | - | Ukupno | |||
| StrongStep®fFn Test | + | 48 | 2 | 50 | |
| - | 1 | 156 | 157 | ||
|
| 49 | 158 | 207 | ||
Analitička osjetljivost
Najmanja količina fFN koja se može detektovati u ekstrahovanom uzorku je 50 μg/L.
Među simptomatičnim ženama, povišeni nivoi (≥ 0,050 μg/mL) (1 x 10-7 mmol/L) fFN između 24 nedelje, 0 dana i 34 nedelje, 6 dana ukazuju na povećan rizik od porođaja za ≤ 7 ili ≤ 14 dana od prikupljanje uzoraka.Među asimptomatskim ženama, povišeni nivoi fFN između 22 sedmice, 0 dana i 30 sedmica, 6 dana ukazuju na povećan rizik od porođaja u ≤ 34 sedmice, 6 dana gestacije.Granica od 50 μg/L fFN ustanovljena je u multicentričnoj studiji koja je sprovedena kako bi se procijenila povezanost između ekspresije fetalnog fibronektina tokom trudnoće i prijevremenog porođaja.
Interferentne supstance
Morate paziti da se aplikator ili cervikovaginalni sekret ne kontaminiraju lubrikantima, sapunima, dezinficijensima ili kremama.Lubrikanti ili kreme mogu fizički ometati apsorpciju uzorka na aplikator.Sapuni ili dezinficijensi mogu ometati reakciju antitijelo-antigen.
Potencijalne interferirajuće supstance su testirane u koncentracijama koje bi se razumno mogle naći u cervikovaginalnom sekretu.Sljedeće supstance nisu interferirale u testu kada su testirane na navedenim nivoima.
| Supstanca | Koncentracija | Supstanca | Koncentracija |
| ampicilin | 1,47 mg/mL | Prostaglandin F2 | a0,033 mg/mL |
| Eritromicin | 0,272 mg/mL | Prostaglandin E2 | 0,033 mg/mL |
| Urin majke 3. trimestar | 5% (volumen) | MonistatR (mikonazol) | 0,5 mg/mL |
| Oksitocin | 10 IU/mL | Indigo Carmine | 0,232 mg/mL |
| terbutalin | 3,59 mg/mL | Gentamicin | 0,849 mg/mL |
| Deksametazon | 2,50 mg/mL | BetadineR Gel | 10 mg/mL |
| MgSO4•7H2O | 1,49 mg/mL | BetadineR Cleanser | 10 mg/mL |
| Ritodrine | 0,33 mg/mL | K-YR Jelly | 62,5 mg/mL |
| DermicidolR 2000 | 25,73 mg/mL |
LITERATURA
1. Američki koledž opstetričara i ginekologa.Preterm Labor.Tehnički bilten, broj 133, oktobar 1989.
2. Creasy RK, Resnick R. Medicina majke i fetusa: Principi i praksa.Philadelphia: WB Saunders;1989.
3. Creasy RK, Merkatz IR.Prevencija prijevremenog porođaja: kliničko mišljenje.Obstet Gynecol 1990;76(Suppl 1):2S–4S.
4. Morrison JC.Prijevremeni porođaj: zagonetka koju vrijedi riješiti.Obstet Gynecol 1990;76(Suppl 1):5S-12S.
5. Lockwood CJ, Senyei AE, Dische MR, Casal DC, et al.Fetalni fibronektin u cervikalnom i vaginalnom sekretu kao prediktor prijevremenog porođaja.New Engl J Med 1991;325:669–74.
RJEČNIK SIMBOLA
|
| Kataloški broj |  | Ograničenje temperature |
 | Pogledajte uputstva za upotrebu |
| Batch code |
 | In vitro dijagnostički medicinski uređaj |  | Koristite do |
 | Proizvođač |  | Sadrži dovoljno zatestovi |
 | Nemojte ponovo koristiti |  | Ovlašteni predstavnik u Evropskoj zajednici |
 | Oznaka CE prema IVD Direktivi o medicinskim uređajima 98/79/EC | ||
Liming Bio-Products Co., Ltd.
No. 12 Huayuan Road, Nanjing, Jiangsu, 210042 PR Kina.
Tel: (0086)25 85476723 Fax: (0086)25 85476387
E-mail:sales@limingbio.com
Web stranica: www.limingbio.com
www.stddiagnostics.com
www.stidiagnostics.com
WellKang doo (www.CE-marking.eu) Tel: +44(20)79934346
29 Harley St., London WIG 9QR,UK Fax: +44(20)76811874
StrongStep® uređaj za brzi test fetalnog fibronektina
Prijevremeni porođaj, koji je Američki koledž opstetričara i ginekologa definirao kao porođaj prije 37. sedmice gestacije, odgovoran je za većinu nehromozomskog perinatalnog morbiditeta i mortaliteta.Simptomi prijetećeg prijevremenog porođaja uključuju kontrakcije maternice, promjenu vaginalnog iscjetka, vaginalno krvarenje, bol u leđima, nelagodu u trbuhu, pritisak u zdjelici i grčeve.Dijagnostički modaliteti za identifikaciju prijetećeg prijevremenog porođaja uključuju praćenje aktivnosti maternice i izvođenje digitalnog cervikalnog pregleda, koji omogućava procjenu dimenzija grlića materice.
StrongStep® Fetal Fibronectin Rapid Test je vizualno interpretirani imunohromatografski test namijenjen za kvalitativno otkrivanje fetalnog fibronektina u cervikovaginalnom sekretu sa sljedećim karakteristikama:
User friendly:postupak u jednom koraku u kvalitativnom testiranju
brzo:potrebno je samo 10 minuta tokom posete istog pacijenta
Bez opreme:bolnice ili kliničko okruženje koje ograničavaju izvor mogu izvršiti ovaj test
Isporučeno:sobna temperatura (2℃-30℃)
